Téma 2.3
Moderné postupy kryoprezervácie
Väčšina ľudí vníma kryoprezerváciu ako jednoduché rozhodnutie: prihlásiť sa alebo nie. Kvalita samotného postupu je však rozhodujúca a bez pochopenia prevádzkových obmedzení ju nemožno posúdiť. O tejto téme má zmysel hovoriť preto, že fyzikálne a biologické zákonitosti sa našim predstavám neprispôsobujú. Ischemické poškodenie sa s pribúdajúcim časom zhoršuje, perfúzia vyžaduje invazívny chirurgický zákrok a kryogénna preprava je technicky náročná. Cieľom je poskytnúť čitateľovi dostatok technických informácií, aby kryoprezerváciu nevnímal ako abstraktný pojem, ale ako súbor konkrétnych postupov, ktorých kvalitu možno posúdiť.
Prvá reakcia (standby a stabilizácia)Čo sa deje po právnom vyhlásení smrti: pohotovostná služba, chladenie, kardiopulmonálna podpora, lieky, meranie a odovzdanie pacienta na kryoprotektívnu perfúziu.Chirurgický postup: perfúzia a kryoprotekciaAko cievny prístup, vymytie krvi a postupná perfúzia kryoprotektív vyvažujú zabránenie tvorbe ľadu proti toxicite, osmotickému stresu a nerovnomernému rozloženiu.Logistika: administratíva a prepravaTomorrow.bio a miestne pohrebné služby zabezpečujú dokumentáciu, povolenia aj prepravu do Švajčiarska. Po vybavení dokumentov je pozemná aj letecká preprava štandardným postupom, ktorý člen nemusí riešiť sám.Kontrolné postupy kvality biostázyKvalita kryokonzervácie sa preukazuje viacerými doplňujúcimi zdrojmi dôkazov: časovaním prípadu, telemetriou perfúzie, štandardizovaným celotelovým CT, elektrónovou mikroskopiou vzoriek nervového tkaniva so súhlasom, dátami z kontrolovaného chladenia a auditovateľnými záznamami o dlhodobom uložení.Riadené chladenie na kryogénne teplotyTomorrow.bio používa počítačom riadené chladenie, viacero vnútorných termočlánkov a viacstupňový protokol: rýchly pokles k teplote skleného prechodu, tepelné žíhanie na zníženie pnutia a následne pokles približne o 1 °C za hodinu až na -196 °C.Ako sa vitrifikačné postupy vyvíjali v časeVitrifikácia sa vyvíjala súčasne v chémii kryoprotektív, v postupnej perfúzii, v kontrole ľadu, v tepelnom inžinierstve, v obnove orgánov, v objemovom zohrievaní a v priamom meraní štruktúry.Zariadenie pre dlhodobé uloženieZariadenie EBF v Rafzi kombinuje pasívne uloženie v kvapalnom dusíku s kontrolovaným chladením, kryogénnym CT, výskumnou infraštruktúrou, oddeleným financovaním pacientov, švajčiarskou nadačnou správou a overiteľnou dlhodobou prevádzkou.Klasický systém kryogénneho uloženiaAko pasívne uloženie v kvapalnom dusíku spája vákuovo izolované dewary, týždenné doplňovanie, nepretržité monitorovanie, redundantné automatické dopĺňanie, vzdialený dohľad a ľudský zásah.Moderný systém kryogénneho uskladnenia (ITS)Tomorrow.bio získala prvý kryostat ITS v ľudskej veľkosti na svete. V súčasnosti prebiehajú viacmesačné testy jeho tepelných vlastností, spotreby dusíka a správania pri poruchách, ešte pred nasadením u pacientov.Hodnotenie ischemickej expozície v kryonike (metrika S-MIX)Ako S-MIX prepočítava čas, teplotu a priebeh podpory na odhadovanú normotermickú ekvivalentnú ischemickú expozíciu, vrátane výpočtu, predpokladov, použitia a limitov.